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Datos del producto:
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| Nombre de producto: | Ligasa de la DNA | 10299ES40: | 40.000 U |
|---|---|---|---|
| 10299ES42: | 400.000 U | 10299ES83: | 1.600.000 U |
| Topo entrado de la DNA (pmol): | Entrado DNA ()/[del ng 0,66 × entraron la longitud de la media de la DNA (el punto de ebullición)] | Uso: | ¡para el uso de la investigación SOLAMENTE! |
| Alta luz: | 400 ligasa de la DNA de U/UL T4,Ligasa de la DNA de la investigación T4,Reactivo bioquímico de la ligasa de la DNA T4 |
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Ligasa rápida de la DNA T4 (400 U/ΜL)
La ligasa rápida de la DNA T4 es un solo producto de la enzima que se puede utilizar para conectar fragmentos de la DNA y el adaptador en curso de construcción de la biblioteca de NGS. El producto ha sido verificado por la alta producción que ordenaba y tiene calidad excelente. Esta enzima tiene una capacidad de ligadura muy eficiente, que es muy conveniente para la ligadura de fragmentos ácidos nucléicos complejos, tales como el adaptador de Ω de la plataforma de MGI. Se recomienda para seleccionar el módulo de la ligadura de la DNA de Hieff NGSTM Ultima (Cat#12604) cuyo componente de la base es ligasa rápida de la DNA T4 para los clientes que no necesitan el ajuste del sistema.
| Nombre de producto | Cat# | Tamaño |
| Ligasa rápida de la DNA T4 (400 U/ΜL) | 10299ES40 | 40.000 U |
| 10299ES42 | 400.000 U | |
| 10299ES83 |
1.600.000 U |
Descripción de producto sobre ligasa rápida de la DNA T4
La ligasa rápida de la DNA T4 es un solo producto de la enzima que se puede utilizar para conectar fragmentos de la DNA y el adaptador en curso de construcción de la biblioteca de NGS. El producto ha sido verificado por la alta producción que ordenaba y tiene calidad excelente. Esta enzima tiene una capacidad de ligadura muy eficiente, que es muy conveniente para la ligadura de fragmentos ácidos nucléicos complejos, tales como el adaptador de Ω de la plataforma de MGI. Se recomienda para seleccionar Hieff NGSTMMódulo de la ligadura de la DNA de Ultima (Cat#12604) cuyo componente de la base es ligasa rápida de la DNA T4 para los clientes que no necesitan el ajuste del sistema.
Componentes del producto de la ligasa rápida de la DNA T4
| Número componente | Componentes | Cat#/Size | ||
| 10299ES40 | 10299ES42 | 10299ES83 | ||
| 10299-A | Ligasa rápida de la DNA T4 (400 U/ΜL) | µL 100 | 1 ml | 4 ml |
| 10299-B | 10 almacenador intermediario de la ligasa de la DNA del × T4 | μL 250 | 5 μL del × 500 | 10 ml |
Instrucciones
1. Los equipos de construcción actuales de la biblioteca de la DNA de la corriente principal no se purifican generalmente después de la reparación del final y del tratamiento del Uno-tizón, y realizan directamente la ligadura del adaptador. Refiera por favor a la preparación siguiente para el sistema de reacción. El vórtice a fondo, hace girar brevemente e incubar para el minuto 15 en 20°C.
| Componentes | Volumen (μL) |
| DNA DA-atada | 60 |
| 10 almacenador intermediario de la ligasa de la DNA del × T4 | 10 |
| CLAVIJA 6000 del 50% | 10* |
| Adaptador de la DNA | X** |
| Ligasa rápida de la DNA T4 (400 U/ΜL) | 15*** |
| ddH2O | Hasta 100 |
[Nota]: la CLAVIJA 6000 del *50% no se proporciona en el equipo, usted necesita prepararlo por ti mismo.
** Refiera a la tabla siguiente para la cantidad de adaptador.
El *** la cantidad de ligasa rápida de la DNA T4 usada puede ser el μL añadido 1-5 según las necesidades.
2. La calidad y la concentración de adaptadores usados directamente afectan a eficacia de la ligadura y a la producción de la biblioteca. Demasiado uso del adaptador puede producir más dimeros del adaptador, mientras que un uso más bajo puede afectar a eficacia de la ligadura y a la producción de la biblioteca. La tabla siguiente enumera la cantidad recomendada de adaptador usada en diversas situaciones entradas de la DNA usando este equipo.
| DNA entrada |
Adaptador: DNA entrada (ratio molar) |
DNA entrada |
Adaptador: DNA entrada (ratio molar) |
| 1 μg | 10:1 | 50 ng | 100:1 |
| 500 ng | 20:1 | 25 ng | 200:1 |
| 250 ng | 40:1 | 1 ng | 200:1 |
| 100 ng | 100:1 | página 500 | 400:1 |
[Nota]: Entrado DNA topo (pmol) ≈ entra DNA ()/[del ng 0,66 longitudes entradas × de la media de la DNA (punto de ebullición)].
Paso 1: Calcule el número de topos de la DNA de la entrada. Fórmula: Entrado DNA topo (pmol) ≈ entra DNA ()/[del ng 0,66 longitudes entradas × de la media de la DNA (punto de ebullición)]; ÷ entrado =100 del topo de la DNA (pmol) (0.66×300) = 0,5 pmol;
Paso 2: Según la tabla antedicha, calcule el número de topos del adaptador añadidos.; Cuando la DNA entrada es 100ng, el ratio molar de adaptadores: la DNA de la entrada es 100:1, y el número de topos del pmol de los adaptadores added=100×0.5 pmol=50;
Paso 3: Calcule el volumen de la adición del adaptador. Concentración del adaptador = 15 μmol/L (si usted utiliza el adaptador de la otra compañía, usted necesita determinar su concentración según sus instrucciones); El volumen de adaptador añadido = los topos del adaptador añadió (la concentración del ÷ del pmol 50) del adaptador (el μL 15 μmol/L) = 3,34 (nota: 15 μmol/L de = μL 15 pmol/);
En resumen, el volumen al cual el adaptador puede ser añadido es el μL 3,4. (Nota: El volumen máximo de la adición del adaptador no excede el μL 5).
El producto se envía con las bolsas de hielo y se puede almacenar en -20°C por dos años.
Definición de la unidad
En un sistema de reacción de la ligadura de 20 μL, cuando el μg 6 de λDNA-traseroⅢ se reacciona en 16℃ por 30 minutos, la cantidad de enzima requerida para dar la ligadura más de 50% de los fragmentos de la DNA fue definida como una unidad (u).
Precauciones
1. La ligasa de la DNA T4 es sensible a la desnaturalización física. Al mezclarse, invierta suavemente el tubo y sacuda bien. No sacuda vigoroso;
2. Las enzimas se deben almacenar en una caja de hielo o en un baño de hielo cuando están utilizadas, y se deben almacenar en -20°C inmediatamente después del uso;
3. ¡Este producto está para el uso de la investigación SOLAMENTE!
4. Para su seguridad y sanidad, lleve por favor las capas del laboratorio y los guantes disponibles para la operación.
Si usted necesita más información sobre esta ligasa rápida de la DNA T4 (400 U/ΜL), entre en contacto con por favor con nosotros, gracias
Persona de Contacto: Ms. Kris Zhang
Teléfono: 0086-0769-85914911
